El Pin-point™ Base Editing mRNA es un sistema diseñado para realizar edición precisa de bases en el genoma, permitiendo introducir mutaciones puntuales dirigidas sin necesidad de generar rupturas de doble cadena en el ADN (DSB) ni depender de reparación dirigida por homología (HDR).

Esta plataforma combina la capacidad de direccionamiento del ADN de una Cas9 nickasa (nCas9) con la actividad de edición de una citidina desaminasa, logrando conversiones específicas de bases cuando se utiliza junto con Pin-point™ synthetic sgRNA. El sistema incluye dos mRNA principales:

• Pin-point nCas9 mRNA, que codifica una versión optimizada para células de mamífero de Cas9 nickasa (D10A) con señales de localización nuclear (NLS) y fusión a UGI, favoreciendo la precisión de la edición.

• Pin-point Rat APOBEC mRNA, que codifica una citidina desaminasa fusionada a una proteína de unión a aptámeros, responsable de catalizar la modificación de bases.

Ambos mRNA se producen mediante transcripción in vitro, incluyen cap 5’ CleanCap AG y cola poli(A) para favorecer su traducción y localización nuclear, y están disponibles en versiones no modificadas o modificadas con 5-metoxi-uridina (5moU) para optimizar su rendimiento en distintos tipos celulares.

En conjunto con los sgRNA Pin-point, este sistema permite implementar edición genética de alta precisión para estudios funcionales, modelado de mutaciones y aplicaciones de ingeniería genética, minimizando efectos asociados a roturas de ADN.