Los Pin-point™ Synthetic sgRNA Validated Controls son guías sintéticas diseñadas como controles positivos para experimentos de edición de bases utilizando la plataforma Pin-point™. Estos reactivos permiten verificar el funcionamiento del sistema y optimizar las condiciones experimentales para lograr una edición genética precisa sin generar rupturas de doble cadena en el ADN.
Los sgRNA Pin-point™ son moléculas quiméricas de 128 nucleótidos que integran crRNA, tracrRNA y una secuencia aptamérica propietaria, lo que permite reclutar de forma eficiente los componentes del sistema de edición. Además, presentan modificaciones químicas en los extremos 5’ y 3’ que aumentan su resistencia a la degradación por nucleasas y mejoran su estabilidad durante los experimentos.
Estos controles están diseñados y validados para su uso con Pin-point nCas9 mRNA y Pin-point Rat APOBEC mRNA, permitiendo evaluar la eficiencia de la conversión dirigida de bases C-G a T-A dentro de la ventana de edición del sistema. Los reactivos están disponibles como sgRNA individuales o como kits de control, que incluyen el sgRNA validado junto con primers de detección forward y reverse para facilitar el análisis de los eventos de edición.
En conjunto, estos controles positivos proporcionan una herramienta confiable para validar la actividad del sistema de edición de bases, optimizar parámetros experimentales y evaluar resultados fenotípicos, como la generación de mutaciones puntuales, codones de parada prematuros o alteraciones en sitios de empalme.

