Conozca cómo la nueva plataforma DyadGuide™ permite expresar dos sgRNAs desde un único sistema y ampliar las posibilidades de knockout, activación y represión génica en modelos celulares complejos.
Las tecnologías CRISPR han transformado el estudio de la función génica, permitiendo analizar de manera precisa el impacto de genes individuales en una amplia variedad de sistemas biológicos.
Sin embargo, muchos fenotipos no dependen de un único gen, sino de redes génicas complejas e interconectadas. En estos escenarios, la modulación simultánea de múltiples genes puede aportar información biológica que no siempre puede obtenerse mediante estrategias de targeting individual.
Para abordar este desafío, el equipo de Dharmacon™ de Revvity desarrolló DyadGuide™, una plataforma lentiviral de expresión dual de sgRNA.
DyadGuide™ utiliza un promotor U6 bidireccional para impulsar una expresión eficiente y uniforme de ambos sgRNAs.
Este diseño busca superar las limitaciones observadas en configuraciones que utilizan múltiples promotores secuenciales, donde la expresión de cada guía puede presentar mayores variaciones.
La plataforma permite:
• Dirigir dos sgRNAs contra un mismo gen, con aplicaciones en activación, represión o knockout.
• Dirigir dos genes diferentes, posibilitando diseños experimentales más complejos.
• Trabajar con formatos de sgRNA solo o configuraciones All-in-one, que incluyen Cas9 o efectores dCas9 dentro del mismo vector lentiviral.
DyadGuide™ está disponible para estrategias de CRISPR knockout, CRISPR activation y CRISPR interference.
Combinada con sistemas lentivirales inducibles, la plataforma permite controlar temporalmente la actividad de Cas9/dCas9.
Este enfoque amplía las posibilidades de estudiar genes esenciales y realizar experimentos en modelos de mayor complejidad biológica.
Durante el webinar “Redefining CRISPR: Inducible, Dual-Gene Perturbation for Powerful Phenotypic Characterization”, especialistas de Revvity mostrarán cómo estas herramientas pueden utilizarse en distintos sistemas celulares.
Durante la sesión se abordarán tres ejemplos:
• Knockout inducible de dos genes en líneas celulares de cáncer, junto con la caracterización de los fenotipos de arresto del crecimiento.
• Diferenciación mejorada de iPSC a astrocitos, mediante la regulación simultánea de factores de transcripción específicos de linaje.
• Control de la inducción de transgenes en esferoides tumorales 3D preformados.
Allyson Malloy
Scientist — Revvity
Malloy trabaja en tecnologías Dharmacon™ relacionadas con CRISPR knockout, CRISPRa, CRISPRi y siRNA, y participó en el desarrollo de la plataforma DyadGuide™ dual-sgRNA.
Dr. Andrew Riching
Senior Scientist — Revvity
Riching trabaja en estrategias de modulación génica con CRISPR y participó en el desarrollo de DyadGuide™, además de otras soluciones de la cartera Dharmacon.
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Desde ETC Internacional, distribuidor autorizado de Revvity en Argentina, acompañamos a grupos de investigación y laboratorios que trabajan en edición genómica, CRISPR y modelos celulares avanzados.
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